本發明涉及一種人胰島素及類似物,包括速效胰島素如門冬胰島素(Insulin aspart)、賴脯胰島素(Insulin Lispro)、賴谷胰島素(Insulin Glulisine);長效胰島素如甘精胰島素(Insulin glargine)、地特胰島素(Insulin Detemir)、德谷胰島素(Insulin Degludec)以及修飾偶聯物如聚乙二醇化胰島素及類似物PEG-Lispro(PEG conjugated insulin lispro )和PEG-Insulin(PEG conjugated des B30 -insulin)的體外細胞法的生物效價測定方法及其應用。該發明采用雄性大鼠前脂肪細胞經體外誘導成脂肪細胞后,采用葡萄糖氧化酶法測定脂肪細胞的培養液中葡萄糖經胰島素作用下的消耗量,計算相應的胰島素生物效價。